呼吸道病毒采樣方法和注意事項

呼吸道病毒感染的實驗室診斷正經(jīng)歷深刻變革，隨著多重PCR、tNGS及POCT核酸檢測技術(shù)的快速發(fā)展，樣本采集質(zhì)量已成為制約檢測效能的瓶頸。2022年發(fā)布的GB/T 42066-2022《急性病毒性感染呼吸道樣本采集》國家標(biāo)準(zhǔn)，系統(tǒng)規(guī)范了從采樣準(zhǔn)備到生物安全的全流程技術(shù)要點，為精準(zhǔn)診斷奠定了基石。本文將深入探討采樣技術(shù)創(chuàng)新與檢測策略優(yōu)化的前沿進展，為提升呼吸道病毒診斷效能提供新思路。

一、樣本采集技術(shù)規(guī)范與進展：從標(biāo)準(zhǔn)化到微創(chuàng)新

植絨鼻咽拭子正逐步取代傳統(tǒng)采樣方法成為呼吸道病毒檢測的標(biāo)準(zhǔn)，其創(chuàng)新性在于采用尼龍纖維垂直排列于塑料桿（常用ABS材質(zhì)塑料）的設(shè)計，顯著提升了對呼吸道上皮細(xì)胞的吸附與釋放效率。多項研究證實，植絨拭子對RSV、腺病毒等常見呼吸道病毒的檢出率比傳統(tǒng)棉拭子提高20%以上，尤其對兒童患者更具優(yōu)勢——一項針對3歲以下住院患兒的研究顯示，植絨拭子與鼻洗液的病毒檢出靈敏度相當(dāng)，但患兒耐受性顯著改善。

采樣操作的技術(shù)細(xì)節(jié)直接影響檢測結(jié)果。國家標(biāo)準(zhǔn)強調(diào)：

• 采樣深度：鼻咽拭子應(yīng)沿鼻腔壁插入直至遇阻力（約鼻尖至耳垂距離），確保到達鼻咽部

• 接觸時間：到達正確位置后需旋轉(zhuǎn)3-5次并停留10-15秒

• 力度控制：需適度加壓刮取上皮細(xì)胞，而非僅接觸分泌物

對于特殊人群需靈活調(diào)整策略：

• 兒童采樣：當(dāng)鼻咽拭子難以實施時，經(jīng)驗證的鼻腔沖洗液或深咳痰液可作為替代

• 老年及敏感人群：唾液采集（咳嗽后深咳吐出的深喉唾液）在癥狀出現(xiàn)5-7天時陽性率可達60%，顯著降低采樣不適

二、多元化樣本采集策略的創(chuàng)新應(yīng)用

突破傳統(tǒng)呼吸道樣本局限，無創(chuàng)替代樣本與環(huán)境生物樣本為精準(zhǔn)診斷開辟新路徑：

1. 非呼吸道樣本的診斷價值

• 新冠肺炎研究中，肛拭子在癥狀初期雖陽性率僅34%，但在老年患者中表現(xiàn)出獨特預(yù)后價值——第1天陽性與死亡率顯著相關(guān)（OR=3.2，p<0.01），且第7天Ct值降低（<25）預(yù)示不良預(yù)后

• 登革熱診斷創(chuàng)新：孟加拉國兒科研究首次證實鼻咽拭子檢測登革病毒靈敏度達90.4%（特異性100%），為血液采集困難患兒提供可靠替代方案

2. 空氣樣本的院感防控價值

主動式生物氣溶膠采樣器的突破性應(yīng)用，使醫(yī)院環(huán)境病毒監(jiān)測成為可能。意大利布雷西亞醫(yī)院采用Coriolis Micro?高流量采樣器（300L/min）結(jié)合PEG核酸濃縮技術(shù)，首次實現(xiàn)空氣中SARS-CoV-2 RNA定量檢測（1171-2225 copies/m3）。研究揭示：

• 普通病房中未戴口罩患者區(qū)域病毒載量最高

• 負(fù)壓病房通風(fēng)雖降低CO?濃度（570-680ppm），仍無法完全消除氣溶膠傳播風(fēng)險

• 數(shù)字孿生技術(shù)優(yōu)化采樣點布局（距墻1米，避開通風(fēng)口），提升監(jiān)測效率

三、檢測方法與樣本類型的協(xié)同優(yōu)化

“樣本-方法”匹配原則是提升診斷效能的核心：

1. 抗原檢測的精準(zhǔn)定位

• 適用于高病毒載量期的快速篩查：發(fā)病初期（24-48小時）鼻咽樣本抗原濃度最高

• 操作要點：采用數(shù)字傳感器判讀減少主觀誤差，避免人工目視判讀導(dǎo)致的假陰性

• 局限性：成人RSV檢測靈敏度僅50%-60%，顯著低于兒童（>80%），源于病毒載量差異

2. 核酸檢測的多維進階

• POCT分子檢測：CLIA豁免平臺的NAAT將TAT縮短至1小時內(nèi)，實現(xiàn)“采樣-結(jié)果”閉環(huán)管理（如流感檢測）

• 多重NAAT革新：單次檢測覆蓋20+病原體，尤其適合混合感染及異常季節(jié)流行病原篩查

• 濃縮技術(shù)突破：氣溶膠樣本經(jīng)PEG濃縮后，RT-PCR檢測限降低10倍（達2 log10 copies/mL）

四、特殊人群與特殊病原體的精準(zhǔn)采樣策略

兒童采樣需突破生理與心理雙重障礙：

• 心理干預(yù)：采用“先演示后操作”模式，降低恐懼感

• 體位優(yōu)化：嬰幼兒抱坐于家長懷中，頭部適度后仰

• 器械創(chuàng)新：推薦使用麥瑞科林研發(fā)的鼻咽拭子或者麥瑞科林專為兒童群體研發(fā)的兒童鼻拭子作為采樣拭子，以降低采樣不適感

• 替代方案驗證：當(dāng)鼻咽拭子不可行時，深咳痰液+核酸保存液的檢出率與鼻咽拭子相當(dāng)，鼻咽拭子相比口咽拭子采樣，不適感還是較為明顯。

新發(fā)病原體采樣需警惕生物安全風(fēng)險：

• 樣本滅活優(yōu)先：當(dāng)樣本有較大傳染風(fēng)險時候，使用含胍鹽的滅活病毒保存液實現(xiàn)采樣即滅活，在新冠疫情其中，核酸采樣都是使用滅活病毒保存液進行滅活處理。

• 運輸規(guī)范：采樣完成后，如果需要郵寄樣本，需要將樣本放入病毒保存液中，麥瑞科林生產(chǎn)的病毒保存液可以常溫保存樣本2-3周時間。

總結(jié)

對于呼吸道病毒檢測，鼻咽植絨拭子作為主流采樣工具，其優(yōu)勢在多項研究中得到驗證，麥瑞科林建議醫(yī)院對患者進行采樣時，首先考慮使用植絨鼻咽拭子，這樣結(jié)果可能更加準(zhǔn)確，對于采樣難度較高的兒童群體，可以考慮用鼻腔沖洗液或深咳痰液替代。麥瑞科林是國內(nèi)專業(yè)的采樣拭子生產(chǎn)廠家，我們可以為客戶免費提供樣本測試，歡迎咨詢。

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