來源:生物角、網(wǎng)絡(luò) 閱讀量:次發(fā)表時間:2024-02-19 13:40:31
一、PBS緩沖液及其配置方法
PBS緩沖液是一種重要的生物化學緩沖液,廣泛應(yīng)用于蛋白抗體實驗和生物學研究中。它能夠維持生物分子的穩(wěn)定性,是細胞培養(yǎng)、免疫印跡、免疫熒光等實驗的理想選擇。
1、配方(以1升PBS緩沖液的配置為例):
● NaCl(氯化鈉): 8g
● KCl(氯化鉀): 0.2g
● Na2HPO4(磷酸氫二鈉): 1.44g
● KH2PO4(磷酸二氫鉀): 0.24g
2、制備步驟:
● 在一個大瓶子或容器中,加入800ml去離子水。確保容器是干凈的,無細菌和雜質(zhì)。
● 分別稱量8g氯化鈉(NaCl)、0.2g氯化鉀(KCl)、1.44g磷酸氫二鈉(Na2HPO4)、0.24g磷酸二氫鉀(KH2PO4)。
● 將氯化鈉、氯化鉀、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀加入水中,攪拌均勻。
● 使用pH計檢測溶液的pH值。PBS緩沖液的pH值應(yīng)在7.2至7.4之間,如果不在這個范圍內(nèi),可以適量加入氫氧化鈉(NaOH)或鹽酸(HCl)來調(diào)節(jié)pH值。
● 確保所有固體物質(zhì)完全溶解,并且溶液是透明的。
● 最后,用去離子水將體積補足至1升(或500ml,根據(jù)需要),攪拌均勻。
● 用0.22微米的濾器過濾PBS緩沖液,以確保無菌。分裝至小瓶中,用無菌技術(shù)保存,避免陽光直射和高溫。
大家需要注意的是,PBS 配方中的成分濃度和 pH 值可能會根據(jù)具體實驗的需求而略有調(diào)整。因此,在配制 PBS 緩沖液時,建議根據(jù)實驗方案和要求進行適度的調(diào)整和優(yōu)化。此外,使用高質(zhì)量的原料和無菌技術(shù)也是非常重要的,尤其是在細胞培養(yǎng)和生物學實驗中。
二、PBS緩沖液的作用
1、維持 pH 值穩(wěn)定:
PBS 是一種緩沖液,可以幫助維持溶液的 pH 值在相對穩(wěn)定的范圍內(nèi)。這對于許多生物學實驗和細胞培養(yǎng)是至關(guān)重要的,因為細胞和生物分子對于 pH 的敏感性較高。
2、維持滲透壓:
PBS 含有適當?shù)柠}濃度,有助于維持溶液的滲透壓。這對于在細胞培養(yǎng)、免疫學和分子生物學實驗中保持細胞結(jié)構(gòu)和功能的完整性至關(guān)重要。
3、稀釋樣本:
PBS 可以用于稀釋生物樣本,如細胞懸液、蛋白溶液等,以便于實驗的進行。它提供了一種穩(wěn)定的溶液環(huán)境,有助于保持生物樣本的活性和完整性。
4、洗滌細胞:
PBS 可以用作細胞的洗滌液,用于去除細胞培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物、培養(yǎng)基殘留物和其他雜質(zhì)。這有助于減少對細胞的影響,提高實驗的準確性。
5、實驗中的穩(wěn)定性:
PBS 是一種廣泛使用的緩沖液,因為它對許多生物分子和實驗條件都具有相對穩(wěn)定的影響,使其成為許多實驗室常用的標配緩沖液。
以上幾個是常見的作用,PBS緩沖液廣泛應(yīng)用于生物學和生化實驗中,在生物學和生化學實驗中扮演著重要的角色。