來源:麥瑞科林 閱讀量:次發(fā)表時(shí)間:2024-05-30 17:20:06
唾液是獲取人類 DNA 的可行且有利的來源,它提供了一種非侵入性且方便的血液樣本替代品。雖然從唾液中提取 DNA 有多種方案,但方案的選擇和儲(chǔ)存時(shí)間會(huì)對(duì)回收 DNA 的數(shù)量、純度、完整性和擴(kuò)增性產(chǎn)生重大影響。研究人員在設(shè)計(jì)涉及唾液樣本 DNA 分析的研究時(shí),應(yīng)仔細(xì)評(píng)估其具體要求以及每種方案的優(yōu)勢(shì)和局限性。
為什么使用唾液采集 DNA?
與傳統(tǒng)的血液樣本相比,從唾液中采集 DNA 有以下幾個(gè)優(yōu)勢(shì)。唾液采集無創(chuàng)、無痛,傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)極低。它不需要專業(yè)人員進(jìn)行采集,允許個(gè)人遠(yuǎn)程提供樣本。此外,唾液不會(huì)凝結(jié),可在提取 DNA 前冷凍,從而延長儲(chǔ)存時(shí)間。與血液相比,唾液含有來自口腔上皮細(xì)胞、白細(xì)胞和微生物的 DNA 混合物,是人類遺傳物質(zhì)的豐富來源。
唾液中的 DNA 由哪些成分組成?
人類唾液中含有復(fù)雜的 DNA 來源混合物。平均 1 毫升唾液中含有約 43 萬個(gè)上皮細(xì)胞、13.6 萬個(gè)白細(xì)胞以及數(shù)十億個(gè)細(xì)菌和其他微生物。上皮細(xì)胞不斷從口腔黏膜脫落,占唾液中人類 DNA 的很大一部分。此外,唾液中的白細(xì)胞也是人類 DNA 的另一個(gè)來源。不過,從唾液中提取的 DNA 還可能含有來自口腔中多種微生物群落的非人類遺傳物質(zhì)。
如何收集和儲(chǔ)存唾液?
可通過各種方法收集唾液,包括將唾液排入收集管、棉簽、棉吐珠、細(xì)胞學(xué)刷或用生理鹽水漱口。為了達(dá)到最佳的 DNA 保存效果,在采集唾液前至少 30 分鐘內(nèi)不能進(jìn)食、喝水、吸煙或接吻。收集唾液樣本后,可將其等分并長期保存在 -20°C 或更低的溫度下。一些商業(yè)試劑盒提供的懸浮緩沖液可穩(wěn)定和保存唾液,以便提取 DNA。
儲(chǔ)存時(shí)間和提取方案如何影響 DNA 的數(shù)量和質(zhì)量?
從唾液中提取 DNA 的數(shù)量和質(zhì)量會(huì)受到儲(chǔ)存時(shí)間和提取方案的影響。一般來說,儲(chǔ)存時(shí)間越長,DNA 的數(shù)量越少,但也有例外。通過分光光度法評(píng)估 DNA 的純度,對(duì)于商業(yè)方法來說,通常不會(huì)受到儲(chǔ)存時(shí)間的影響,但對(duì)于非商業(yè)方法來說,當(dāng)唾液儲(chǔ)存時(shí)間過長時(shí),純度可能會(huì)降低。此外,用電泳法測(cè)定的 DNA 完整性在不同的方法中也有很大差異,有些方法能持續(xù)提取出未破碎的 DNA,而有些方法則提取出破碎或檢測(cè)不到的 DNA,尤其是在儲(chǔ)存時(shí)間較長的情況下。
提取的 DNA 可以通過 PCR 擴(kuò)增嗎?
聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是一種用于擴(kuò)增特定 DNA 區(qū)域進(jìn)行分析的常用技術(shù)。使用人類特異性引物擴(kuò)增提取 DNA 的能力可以作為是否成功回收大量人類 DNA 的指標(biāo)。除涉及苛刻化學(xué)物質(zhì)或條件的方案外,大多數(shù)方案通常都能獲得可使用人類特異性引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增的 DNA 樣本,而與儲(chǔ)存時(shí)間無關(guān)。不過,PCR 擴(kuò)增的效率可能會(huì)受到提取 DNA 的完整性和純度的影響。

麥瑞科林一體式唾液采集器由收集漏斗、5ML保存管、收集管帽組成,獨(dú)特的一體式設(shè)計(jì),結(jié)構(gòu)更簡(jiǎn)潔,并消除了誤食儲(chǔ)存液的風(fēng)險(xiǎn)。通過避免在采集過程中與嘴或手直接接觸,它能確保儲(chǔ)存液不受污染、不溢出。
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