關(guān)于Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基一些常見問題

Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基已成為微生物學(xué)領(lǐng)域不可缺少的工具。它在維護(hù)和運(yùn)輸細(xì)菌標(biāo)本方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，特別是與腸道病原體有關(guān)的標(biāo)本。由于微生物學(xué)分析依賴于準(zhǔn)確和及時的診斷，使用適當(dāng)?shù)倪\(yùn)輸介質(zhì)對于確保收集樣本的完整性至關(guān)重要。

本文簡要介紹了Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)，并強(qiáng)調(diào)了它在現(xiàn)代微生物學(xué)領(lǐng)域的重要性。接下來的章節(jié)將深入探討這種運(yùn)輸介質(zhì)的歷史、組成和各種應(yīng)用，以及討論標(biāo)本收集和處理的最佳實(shí)踐。通過了解Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)在現(xiàn)代實(shí)驗室診斷中的重要性，我們可以更好地理解它對提高微生物學(xué)分析的準(zhǔn)確性和效率的影響。

一、Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基的歷史和發(fā)展

Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)起源于20世紀(jì)初，當(dāng)時微生物學(xué)家正在尋求更好的方法來運(yùn)輸和保存用于分析的細(xì)菌標(biāo)本。這種介質(zhì)的開發(fā)是基于1943年Stuart博士創(chuàng)建的早期Stuart運(yùn)輸介質(zhì)，目的是在運(yùn)輸過程中維持病原體細(xì)菌的生存能力。

隨著對更有效的運(yùn)輸介質(zhì)的需求增加，研究人員Cary博士和Blair博士在1964年推出了Stuart介質(zhì)的改良版。這種新配方被命名為Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)，特別是針對腸道病原體（如沙門氏菌和志賀氏菌屬）提供了改進(jìn)的細(xì)菌生存能力。兩種介質(zhì)之間的關(guān)鍵差異在于用硫代乙酸鈉替代了甘油磷酸酯，這有助于維持更穩(wěn)定的pH值并減少細(xì)菌過度生長的風(fēng)險。

隨著時間的推移，Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)經(jīng)過各種改進(jìn)和修改，以進(jìn)一步提高其在保存細(xì)菌標(biāo)本方面的性能。今天，它被廣泛認(rèn)為是運(yùn)輸腸道病原體和其他細(xì)菌的黃金標(biāo)準(zhǔn)，它的使用為微生物學(xué)和實(shí)驗室診斷領(lǐng)域的顯著進(jìn)步做出了貢獻(xiàn)。

二、Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基的組成和性質(zhì)

Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)在保存細(xì)菌標(biāo)本方面的有效性可以歸因于其獨(dú)特的組成和性質(zhì)。介質(zhì)由一種精心平衡的化學(xué)物質(zhì)混合物組成，旨在在防止非目標(biāo)微生物過度生長的同時，維持細(xì)菌細(xì)胞的生存能力。

Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)的關(guān)鍵成分之一是硫代乙酸鈉，它作為一種還原劑發(fā)揮作用。這種物質(zhì)有助于維持穩(wěn)定的pH值，并創(chuàng)造出一個有利于目標(biāo)細(xì)菌生存的環(huán)境，同時抑制不需要的微生物的生長。介質(zhì)中的其他成分包括氯化鈉，它有助于調(diào)節(jié)滲透壓，以及氯化鈣，它支持細(xì)菌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。

三、 Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基的制備

按照制造商的說明進(jìn)行制備：

1. 將12.6克粉末懸浮在991毫升蒸餾水中。 

2. 加熱至沸騰，完全溶解介質(zhì)。

3. 冷卻至50°C，無菌地加入1%的水鈣氯溶液9毫升。（注意：Cary-Blair的各種商業(yè)可得到的脫水配方有所不同，有些需要添加鈣氯化物，有些則不需要。） 

4. 如有必要，將pH調(diào)整到8.4。

5. 將7毫升的介質(zhì)倒入9毫升容量的螺紋蓋瓶（大號Bijou瓶），確保介質(zhì)覆蓋棉簽至少4厘米。

6. 用松動的蓋子蒸汽滅菌（不要自動消毒）在100°C下加熱15分鐘。

7. 冷卻后，擰緊瓶蓋并標(biāo)記瓶子。

8. 為每個瓶子分配日期、批號和有效期（制備后6個月）。

9. 將瓶子存放在陰涼、干燥的地方，瓶蓋要緊緊擰緊。

四、 Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基的標(biāo)本收集和處理

Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)特別適用于收集和運(yùn)輸各種標(biāo)本，特別是與腸道病原體有關(guān)的標(biāo)本。為確保微生物學(xué)分析的完整性和準(zhǔn)確性，必須遵循適當(dāng)?shù)臉?biāo)本收集和處理程序。

使用Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)時，必須選擇適當(dāng)?shù)臉?biāo)本類型，例如糞便樣本或直腸拭子，以檢測腸道病原體。收集過程應(yīng)無菌進(jìn)行，以避免污染并最小化引入非目標(biāo)微生物的風(fēng)險。

（1）標(biāo)本收集

注意：在收集標(biāo)本之前，患者應(yīng)避免使用抗酸劑、鋇、鉍、抗生素、抗瘧疾藥物、止瀉藥物或油性瀉藥。收集標(biāo)本應(yīng)推遲5至10天或至少在服用鋇或抗生素后兩周。

1. 為確?；謴?fù)細(xì)菌，間歇收集多天的幾個標(biāo)本是必要的。

2. 為防止與尿液或水污染，正確的標(biāo)本收集非常重要（請參見收集說明）。最好在便盆中收集標(biāo)本?；蛘?，使用一個干凈、無菌的容器，例如一個去掉頂部并徹底清洗過的牛奶容器，或者在馬桶座位開口處放置塑料薄膜。

3. 使用提供的收集勺，從糞便的側(cè)面、末端和中部選擇適當(dāng)?shù)膮^(qū)域（例如血腥、黏液或水樣）。將容器填滿足夠的糞便到達(dá)“填充”線，結(jié)果大約為5毫升的樣本。

4. 使用提供的勺攪拌每個標(biāo)本，固定蓋子，劇烈搖晃，直到標(biāo)本混合均勻。混合完成后，標(biāo)本應(yīng)呈均勻狀態(tài)。

5. 在每個瓶子上填寫標(biāo)簽，并將瓶子放回塑料袋中。將標(biāo)本運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗室。標(biāo)本可以冷藏或存放在室溫下。

（2）標(biāo)本處理

Cary Blair介質(zhì)協(xié)議包括一個緩沖系統(tǒng)，可防止出現(xiàn)酸性pH轉(zhuǎn)移，從而對志賀氏菌和沙門氏菌屬的恢復(fù)產(chǎn)生負(fù)面影響。如果緩沖能力超過了，將出現(xiàn)黃色，表明介質(zhì)已達(dá)到不良酸性pH，不宜使用。為了獲得最佳的細(xì)菌恢復(fù)效果，介質(zhì)應(yīng)呈紅色。將Cary Blair體系瓶在20-25°C存儲。該系統(tǒng)適用于多種程序，應(yīng)視為綜合檢查的一部分。

在獲取標(biāo)本后，應(yīng)立即將其轉(zhuǎn)移到含有Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)的瓶子或容器中。必須徹底混合標(biāo)本和介質(zhì)，以確保細(xì)菌細(xì)胞的均勻分布和適當(dāng)保存。還重要的是清晰地標(biāo)記容器，包括相關(guān)信息，如患者詳細(xì)信息、收集日期和時間。

在存儲和運(yùn)輸方面，使用Cary-Blair運(yùn)輸介質(zhì)的樣本應(yīng)保持在環(huán)境溫度或冷藏溫度下，理想情況下應(yīng)在4°C和25°C之間。將樣本運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗室應(yīng)盡快進(jìn)行，最好在收集后48小時內(nèi)，以最大程度地提高恢復(fù)活細(xì)菌細(xì)胞的機(jī)會。

處理前：

1. 添加足夠的樣本以達(dá)到填充線。

2. 保持瓶子在室溫下，避免極端溫度。

3. 使用附在蓋子上的勺子，徹底攪拌樣本，直到樣本均勻。

4. 重要提示：pH指示劑必須為紅色。如果介質(zhì)變黃，表明pH值為酸性，不適合使用。在這種情況下，必須收集新的標(biāo)本。

處理過程：

1. 徹底混合瓶子中的內(nèi)容。

2. 取下瓶蓋，將其放在浸泡在消毒劑中的紙巾上。

3. 按照實(shí)驗室的標(biāo)準(zhǔn)操作程序從Cary Blair瓶中接種介質(zhì)。

4. 重新封閉瓶子，按照您的實(shí)驗室傳染性廢物政策處置。建議在處置前進(jìn)行高壓滅菌或消毒。

五、Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基的應(yīng)用和好處

Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基在微生物學(xué)中具有廣泛的應(yīng)用，特別是在腸道病原菌的分離和鑒定方面。其獨(dú)特的成分和性質(zhì)使其成為保存細(xì)菌在運(yùn)輸和儲存過程中生命活力和形態(tài)的首選培養(yǎng)基，最終提高微生物診斷的準(zhǔn)確性。

Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基非常適合運(yùn)輸疑似含有腸道病原菌的臨床樣本，如志賀菌，沙門菌，霍亂弧菌和大腸桿菌O157：H7。其高pH（8.4）有助于維持霍亂弧菌的生命活力，因此Cary-Blair成為首選的霍亂弧菌運(yùn)輸和保存培養(yǎng)基。

Cary-Blair培養(yǎng)基的半固態(tài)一致性保證了其易于運(yùn)輸，而經(jīng)過處理的培養(yǎng)基可在室溫下保存一年。Cary-Blair培養(yǎng)基基質(zhì)配方中含有最少的營養(yǎng)物質(zhì)來支持微生物的生存而不促進(jìn)微生物繁殖。培養(yǎng)基的堿性pH有助于減少酸性形成引起的細(xì)菌破壞。

六、使用Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基的限制和注意事項

雖然Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基在保存許多細(xì)菌樣本的生命活力和形態(tài)方面非常有效，但在使用該培養(yǎng)基時，必須認(rèn)識到其局限性并采取必要的預(yù)防措施。

Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基可能不適用于所有類型的微生物。例如，它不適用于厭氧菌，病毒或真菌的保存。因此，在處理可能含有這些微生物的樣本時，應(yīng)采用替代性運(yùn)輸培養(yǎng)基或?qū)ｉT的采集方法。

在潛在危險和安全措施方面，必須小心處理Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基，因為其中的某些成分（例如硫代乙酸鈉）如果被吞咽或吸入可能會有害。在樣本采集和處理過程中必須戴上適當(dāng)?shù)膫€人防護(hù)裝備，如手套和安全眼鏡，以最小化暴露風(fēng)險。

（1）限制：

1. 培養(yǎng)基的pH：室溫下的pH應(yīng)在8.3-8.5范圍內(nèi)。

2. 保質(zhì)期：Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基在緊密封閉的容器中存放在陰涼，暗處可以高度穩(wěn)定，以防止干燥。在沒有容量損失，污染，pH改變或顏色變化的情況下，可以使用該培養(yǎng)基長達(dá)一年。

（2）注意事項：

1. Cary-Blair培養(yǎng)基專門用于運(yùn)輸目的。運(yùn)輸或處理樣本的延遲時間過長可能會導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞的生命活力下降，并可能允許污染的微生物在培養(yǎng)基中繁殖。因此，快速運(yùn)送和處理樣本對于準(zhǔn)確和確定性的實(shí)驗室結(jié)果至關(guān)重要。

2. 對于識別志賀菌，及時在Cary-Blair培養(yǎng)基中進(jìn)行板接，冷藏或冷凍是非常重要的，因為比其他腸道細(xì)菌更脆弱。Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基對極端溫度非常敏感，不能進(jìn)行自動消毒。雖然已經(jīng)確認(rèn)了其可消毒性，但不能100％保證。

3. 在開始使用抗生素治療后采集的樣本可能無法準(zhǔn)確反映腸道病原菌的存在或缺失，從而可能影響治療結(jié)果。

微生物學(xué)領(lǐng)域不斷發(fā)展，隨之而來的是運(yùn)輸培養(yǎng)基的進(jìn)步和創(chuàng)新，包括Cary-Blair運(yùn)輸培養(yǎng)基。研究人員正在探索新的配方，添加劑和技術(shù)，以進(jìn)一步改善細(xì)菌樣本的保存，并擴(kuò)大運(yùn)輸培養(yǎng)基適用的微生物范圍。

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