如何優(yōu)化無菌拭子的釋放效率

無菌拭子用于對(duì)潔凈室的表面進(jìn)行采樣。Satyada 和 Sandle 在 2017 年進(jìn)行的一項(xiàng)研究調(diào)查了棉簽釋放采樣微生物能力的優(yōu)化問題。他們對(duì)稀釋劑、渦旋混合時(shí)間和保持時(shí)間等因素的研究結(jié)果為提高棉簽取樣方法的穩(wěn)健性提供了指導(dǎo)。

表面采樣前是否應(yīng)預(yù)濕無菌拭子？

作為環(huán)境監(jiān)測(cè)計(jì)劃的一部分，無菌拭子通常用于在潔凈室和受控環(huán)境中進(jìn)行表面采樣。但這些棉簽是否應(yīng)該在采樣前預(yù)濕，以幫助從表面回收微生物？Satyada 和 Sandle 最近的一項(xiàng)研究調(diào)查了預(yù)消毒棉簽在不同渦流混合時(shí)間后釋放采樣微生物的能力。他們的研究結(jié)果為預(yù)濕棉簽和最佳渦旋時(shí)間提供了一些指導(dǎo)。

哪些因素會(huì)影響無菌拭子的微生物回收率？

拭子的設(shè)計(jì)因素（如尖端材料和編織）各不相同，這些因素會(huì)影響拭子從表面拾取和釋放微生物的能力。普通拭子尖端通常只能回收表面微生物的 5-15%。然而，拭子尖端由垂直于軸的編織纖維制成的植絨拭子可回收表面微生物的 40-60%。拭子的尖端與表面相互作用，從而捕獲微生物。預(yù)濕可促進(jìn)物理分離和水力清除，從而改善拾取效果。但隨后需要將微生物有效地釋放到溶液中進(jìn)行分析。拭子在稀釋液中的渦旋混合和均質(zhì)化是去除生物進(jìn)行檢測(cè)的關(guān)鍵。樣品在處理前的放置時(shí)間也會(huì)影響微生物的存活率和回收率。

拭子釋放研究是如何進(jìn)行的？

Satyada 和 Sandle 評(píng)估了六種代表不同形態(tài)和細(xì)胞壁的 ATCC 菌株以及一種分離出的人體皮膚共生菌從棉簽到生理鹽水稀釋液中的釋放情況。在進(jìn)行膜過濾定量之前，將拭子渦旋混合 15、30、45 或 60 秒。回收率與直接加入稀釋液的陽性對(duì)照進(jìn)行比較。拭子僅在渦旋 15 秒后就釋放出 50%以上的微生物，時(shí)間越長，回收率越低。15 秒的最佳時(shí)間適用于所有測(cè)試的微生物菌株。

拭子釋放研究的結(jié)果是什么？

主要發(fā)現(xiàn)是，15 秒的渦旋混合能釋放出足夠比例（大于 50%）的拭子尖端拾取的微生物。雖然回收率達(dá)到了 80%-100%，但延長渦旋時(shí)間并不能顯著提高拾取率。作者得出結(jié)論，15 秒鐘的渦旋時(shí)間足以讓植棉拭子在表面采樣時(shí)獲得有用的微生物回收率。這種使用最短有效渦旋時(shí)間的精益原則有助于簡化程序。研究還表明，建議將拭子釋放效率評(píng)估作為環(huán)境監(jiān)測(cè)方法驗(yàn)證的一部分。

表面采樣前是否應(yīng)預(yù)濕拭子？

預(yù)濕拭子吸頭被認(rèn)為是有助于有效去除表面微生物的最佳做法。水潤的拭子頭能更好地與表面相互作用，拾取微生物。與干燥的拭子吸頭相比，液體還有助于物理分離和清除。因此，建議在使用拭子進(jìn)行表面取樣時(shí)進(jìn)行預(yù)濕。不過，采樣前應(yīng)去除過多水分，以免稀釋樣本。該研究使用生理鹽水預(yù)濕拭子作為優(yōu)化的基線方法。

拭子設(shè)計(jì)和稀釋劑會(huì)影響微生物釋放嗎？

該研究只考察了一種拭子類型，但設(shè)計(jì)確實(shí)會(huì)影響拾取和釋放。在微生物回收方面，植絨拭子優(yōu)于普通棉簽頭。該研究還使用了一種稀釋劑，即生理鹽水。其他稀釋劑可能會(huì)產(chǎn)生不同的生物釋放動(dòng)力學(xué)和回收率。常用的稀釋劑有磷酸鹽緩沖鹽水或 Dey-Engley 肉湯，或 Triton X-100 等表面活性劑。稀釋劑可以幫助微生物在渦旋過程中脫離拭子纖維。稀釋劑的化學(xué)效果值得進(jìn)一步研究。

我們應(yīng)該用拭子還是接觸板對(duì)表面進(jìn)行采樣？

與拭子相比，接觸板通常能更好地回收微生物。它們能對(duì)一個(gè)確定的區(qū)域進(jìn)行采樣，而且涉及的程序步驟較少。不過，拭子對(duì)于平板無法使用的不規(guī)則設(shè)備表面采樣仍然有用。使用平板對(duì)關(guān)鍵的平整表面進(jìn)行采樣和使用拭子對(duì)不規(guī)則區(qū)域進(jìn)行采樣相結(jié)合的方法是最佳選擇。但對(duì)于拭子取樣來說，了解取樣方法的效率非常重要。應(yīng)評(píng)估渦旋混合時(shí)間和稀釋劑等因素，以優(yōu)化采集和回收。

樣本在處理前應(yīng)放置多長時(shí)間？

該研究立即處理了加標(biāo)拭子。但是，采樣和檢測(cè)之間的保存時(shí)間和溫度會(huì)影響微生物的存活率和回收率。例如，一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，在室溫下保存超過 4 小時(shí)的樣本回收率明顯較低。為保持樣本的完整性，建議進(jìn)行有控制的保存和快速處理。保溫時(shí)間驗(yàn)證可作為拭子釋放評(píng)估的補(bǔ)充。

還有哪些因素會(huì)影響拭子采樣方法的穩(wěn)定性？

除了接觸時(shí)間、壓力和采樣面積外，采樣操作人員的技能和技術(shù)等因素也會(huì)影響拭子采樣結(jié)果。表面材料和粗糙度等環(huán)境因素也會(huì)產(chǎn)生影響。本研究中展示的高效渦流混合有助于提高方法的穩(wěn)定性。對(duì)采樣數(shù)據(jù)進(jìn)行持續(xù)的趨勢(shì)分析，可以發(fā)現(xiàn)任何新出現(xiàn)的不一致之處。歸根結(jié)底，拭子方法與接觸板相比具有固有的可變性。但通過優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化，它們?nèi)匀皇且环N有價(jià)值的表面監(jiān)測(cè)工具。

參考文獻(xiàn)

 Sandle, Tim & Satyada, Ravikrishna. (2017). Releasing capacity of pre-sterile cotton swabs for discharging sampled microorganisms. European Journal of Parenteral and Pharmaceutical Sciences. 21. 121-128.

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