采集糞便樣本用于腸道寄生蟲診斷的必要性

糞便樣本采集和分析是檢測(cè)腸道寄生蟲感染的重要診斷工具。在環(huán)境衛(wèi)生和個(gè)人衛(wèi)生條件較差的地區(qū)，腸道寄生蟲可能很普遍，并導(dǎo)致嚴(yán)重的發(fā)病率，尤其是兒童。通過糞便檢查診斷出這些感染后，就可以采取適當(dāng)?shù)闹委熀图膊】刂拼胧?。莫桑比克貝拉的一家醫(yī)院注意到當(dāng)?shù)胤钦?guī)居住區(qū)有很多腹瀉病例，認(rèn)為寄生蟲感染是需要調(diào)查的潛在原因，于是啟動(dòng)了這項(xiàng)研究。

糞便分析使用什么技術(shù)？

有幾種實(shí)驗(yàn)室技術(shù)可用于檢測(cè)糞便樣本中的寄生蟲卵、幼蟲、包囊或卵囊。研究比較了五種常見的顯微鏡方法：直接涂片法、甲醛-乙醚濃縮法（FEC）、加藤涂片法、巴曼法和共培養(yǎng)法。直接涂片法是將糞便與生理鹽水混合，然后在顯微鏡下進(jìn)行檢查。正式乙醚濃縮法使用乙醚沉淀法濃縮糞便中的寄生蟲。加藤涂片法將糞便放在玻璃紙蓋下的載玻片上進(jìn)行定量。Baermann 法過濾出線蟲幼蟲進(jìn)行檢測(cè)。共培養(yǎng)法可對(duì)糞便進(jìn)行培養(yǎng)，根據(jù)形態(tài)識(shí)別寄生蟲幼蟲。每種技術(shù)在能檢測(cè)的寄生蟲種類和生命階段方面都有其優(yōu)勢(shì)和局限性。

關(guān)于感染率的主要發(fā)現(xiàn)是什么？

研究發(fā)現(xiàn)定居點(diǎn)的寄生蟲感染率極高。96% 的受試者至少感染了一種蠕蟲，最常見的是鞭蟲（93%）、蛔蟲（56%）、鉤蟲（38%）和盤尾絲蟲（48%）。49%的人同時(shí)感染了三種或三種以上的蠕蟲，最多的一個(gè)人同時(shí)感染了五種蠕蟲。11%的人感染了曼氏血吸蟲。37%的人感染了最常見的致病原蟲--腸賈第蟲?？傮w而言，98%的人至少攜帶一種腸道寄生蟲。這證明了全面糞便篩查在確定高危人群中多寄生蟲真正流行率方面的價(jià)值。

顯微鏡檢測(cè)與 PCR 檢測(cè)相比效果如何？

比較了五種顯微鏡檢查方法與 PCR 檢測(cè)糞便樣本中寄生蟲 DNA 的診斷準(zhǔn)確性。對(duì)于所有檢測(cè)的蠕蟲，PCR 的靈敏度都高于顯微鏡檢查，即使將顯微鏡檢查結(jié)果合并在一起也是如此。這種差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著意義。顯微鏡檢查漏檢了許多感染病例，尤其是 PCR Ct 值較高的輕度感染病例。不過，如果寄生蟲血癥很低，一些顯微鏡檢查陽(yáng)性結(jié)果無(wú)法通過 PCR 得到確認(rèn)。總的來說，PCR 能夠檢測(cè)到更多的寄生蟲，并能區(qū)分顯微鏡檢查無(wú)法區(qū)分的寄生蟲種類。但 PCR 需要更多的資源，在野外環(huán)境中可行性較低。

糞便篩查的最佳方法是什么？

沒有一種顯微鏡技術(shù)能可靠地檢測(cè)出所有致病寄生蟲種類。食物中毒檢測(cè)儀能檢測(cè)出最廣泛的蠕蟲，而共培養(yǎng)法最適合檢測(cè)斯特龍線蟲，巴曼法只適合檢測(cè)斯特龍線蟲。與依賴任何一種技術(shù)相比，將多種簡(jiǎn)單的方法結(jié)合起來能更準(zhǔn)確地反映多寄生蟲的流行情況。即使在高端流行病環(huán)境中，PCR 也是最靈敏的方法，但在資源匱乏地區(qū)，這種方法的可及性有限。需要進(jìn)一步研究開發(fā)更多適用于現(xiàn)場(chǎng)的診斷方法，以捕捉影響高危人群的各種腸道寄生蟲。

研究對(duì)象和采樣方法如何？

該研究檢查了在非正規(guī)居住區(qū)隨機(jī)抽取的 63 戶家庭中 303 人的糞便樣本。樣本逐戶收集，并在 24 小時(shí)內(nèi)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)分析。與延遲處理相比，這確保了樣本在地理分布上的代表性和結(jié)果的高質(zhì)量。參與率為 76%。與僅使用一種方法的研究相比，使用多種技術(shù)進(jìn)行嚴(yán)格診斷可獲得可靠的流行率估計(jì)值。

做了哪些倫理方面的考慮？

在啟動(dòng)研究之前，已獲得莫桑比克和荷蘭倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。已征得戶主的知情同意。陽(yáng)性患者按照當(dāng)?shù)蒯t(yī)院的治療方案進(jìn)行治療。樣本在進(jìn)一步分析前已匿名。這些措施對(duì)于保護(hù)受試者和確保參與的自愿性非常重要。

通過全面的糞便篩查，我們可以深入了解寄生蟲感染給發(fā)展中國(guó)家邊緣化人群帶來的巨大但卻被忽視的負(fù)擔(dān)。采用改進(jìn)的診斷和治療策略可以大大降低腸道蠕蟲和原生動(dòng)物的發(fā)病率和對(duì)健康的不利影響。

參考文獻(xiàn)

Meurs L, Polderman AM, Vinkeles Melchers NV, Brienen EA, Verweij JJ, Groosjohan B, Mendes F, Mechendura M, Hepp DH, Langenberg MC, Edelenbosch R, Polman K, van Lieshout L. Diagnosing Polyparasitism in a High-Prevalence Setting in Beira, Mozambique: Detection of Intestinal Parasites in Fecal Samples by Microscopy and Real-Time PCR. PLoS Negl Trop Dis. 2017 Jan 23;11(1):e0005310. doi: 10.1371/journal.pntd.0005310. PMID: 28114314; PMCID: PMC5289637.

文章為麥瑞科林原創(chuàng)，如需轉(zhuǎn)載，請(qǐng)注明文章鏈接和出處。