MRSA耐甲氧西林金葡菌檢測(cè)拭子取樣方法

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是一種特殊的葡萄球菌，經(jīng)常出現(xiàn)在人體皮膚或鼻孔中，不會(huì)對(duì)人體造成傷害。但是，如果這些細(xì)菌從開(kāi)放性傷口進(jìn)入，就會(huì)引發(fā)感染。大多數(shù)葡萄球菌感染是輕微的，可以用抗生素治療。然而，MRSA 細(xì)菌對(duì)普通抗生素有抗藥性，導(dǎo)致其肆意生長(zhǎng)--這種現(xiàn)象被稱為抗生素耐藥性。這種抗藥性使治療變得復(fù)雜，導(dǎo)致美國(guó)每年有近 300 萬(wàn)例感染和超過(guò) 35,000 例死亡。

MRSA 最初流行于醫(yī)院，現(xiàn)在在健康人中無(wú)處不在。它可以通過(guò)個(gè)人接觸或與受污染物體的相互作用傳播。它在宿舍或更衣室等擁擠的環(huán)境中尤為流行。MRSA 的鑒定是通過(guò)檢測(cè)分析傷口、鼻孔或其他體液樣本來(lái)完成的。如果不及時(shí)治療，MRSA 感染可能會(huì)發(fā)展成重癥或死亡，但可以使用強(qiáng)效抗生素進(jìn)行治療。

我們將深入探討如何進(jìn)行檢測(cè)，以及醫(yī)生如何利用這種檢測(cè)來(lái)識(shí)別和管理這種具有挑戰(zhàn)性的病原體。敬請(qǐng)關(guān)注，全面了解這一過(guò)程。

采集 MRSA 拭子樣本的說(shuō)明

在采集 MRSA 鼻腔、咽喉和腹股溝拭子進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，請(qǐng)仔細(xì)遵循以下步驟說(shuō)明。

采集拭子前

- 用肥皂和水徹底清洗雙手。

- 準(zhǔn)備所需材料：拭子包、運(yùn)送管、患者標(biāo)簽、生物危險(xiǎn)袋。

鼻咽樣本采集：

1. 打開(kāi)鼻咽拭子包，取出拭子。

2. 將拭子頂端插入一個(gè)鼻孔，對(duì)著鼻黏膜輕輕旋轉(zhuǎn)。

3. 使用相同的棉簽在第二個(gè)鼻孔重復(fù)上述操作。

4. 將拭子插入輸送管，在斷點(diǎn)處折斷拭子軸。

咽喉樣本采集：

1. 打開(kāi)口咽拭子包，取出拭子。

2. 將口咽拭子尖端插入咽后和扁桃體區(qū)域并輕輕旋轉(zhuǎn)。

3. 將口咽拭子插入輸送管，在斷點(diǎn)處折斷咽拭子桿。

腹股溝拭子：

1. 打開(kāi)腹股溝拭子包，取出拭子，只處理拭子軸。

2. 擦拭腹股溝褶皺處的皮膚，旋轉(zhuǎn)棉簽尖端數(shù)次。

3. 將拭子插入運(yùn)輸管，在斷點(diǎn)處折斷拭子軸。

采集后：

- 在所有運(yùn)送管上貼上患者身份標(biāo)簽。

- 將運(yùn)送管放入生物危險(xiǎn)袋中進(jìn)行處理。

- 適當(dāng)丟棄用過(guò)的拭子包。

MRSA 篩查試驗(yàn)

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）已成為全球醫(yī)療相關(guān)感染的主要原因。MRSA 指的是對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素（包括青霉素類、頭孢菌素類和碳青霉烯類）具有耐藥性的金黃色葡萄球菌菌株。這種耐藥性是由 mecA 基因介導(dǎo)的，該基因編碼一種改變的青霉素結(jié)合蛋白 PBP2a，它對(duì)這些抗生素的親和力較低，即使在有β-內(nèi)酰胺存在的情況下也能合成細(xì)胞壁。

在臨床實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中準(zhǔn)確檢測(cè) MRSA 對(duì)于選擇適當(dāng)?shù)目股刂委熀椭贫ㄓ行У母腥究刂拼胧┲陵P(guān)重要。然而，由于可能存在異抗性，即在一個(gè)分離物中可能同時(shí)存在具有不同敏感性的亞群，因此確定甲氧西林耐藥性具有挑戰(zhàn)性。因此，要對(duì) MRSA 菌株進(jìn)行可靠的表型鑒定，就必須按照標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議采用謹(jǐn)慎的檢測(cè)方法。

檢測(cè)理論

由于細(xì)菌培養(yǎng)物中可能存在異質(zhì)性，準(zhǔn)確檢測(cè)金黃色葡萄球菌對(duì)甲氧西林的耐藥性十分困難。當(dāng)同一分離物中同時(shí)存在耐藥細(xì)胞亞群和易感細(xì)胞亞群時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象，即異抗性。

與易感細(xì)胞相比，耐甲氧西林亞群的生長(zhǎng)速度較慢。如果檢測(cè)條件沒(méi)有優(yōu)化，生長(zhǎng)速度較快的易感細(xì)胞可能會(huì)超過(guò)耐藥細(xì)胞，從而導(dǎo)致假陰性結(jié)果。有幾個(gè)因素會(huì)導(dǎo)致這種檢測(cè)難題：

- 培養(yǎng)溫度：抗性細(xì)胞在 33-35°C 的溫度下生長(zhǎng)得更好。更高的溫度有利于易感細(xì)胞的生長(zhǎng)。檢測(cè)方案必須堅(jiān)持 33-35°C 的孵育溫度，以便進(jìn)行可靠的檢測(cè)。

- 誘導(dǎo)劑的選擇：與氧青霉素相比，頭孢西丁是更好的 mecA 表達(dá)誘導(dǎo)劑。它是最佳的替代標(biāo)記物，應(yīng)納入檢測(cè)程序。

- 培養(yǎng)時(shí)間：培養(yǎng) 24 小時(shí)可使生長(zhǎng)較慢的耐藥亞群充分生長(zhǎng)。縮短培養(yǎng)時(shí)間有可能錯(cuò)過(guò)耐藥性的表達(dá)。

完整的 MRSA 檢測(cè)實(shí)驗(yàn)程序

1. 分離純菌落：從培養(yǎng)板中獲取分離良好的金黃色葡萄球菌菌落，制備標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞懸液進(jìn)行檢測(cè)。

2. 制備細(xì)胞懸液：將分離菌制成懸浮液，調(diào)整至 0.5 McFarland 渾濁度標(biāo)準(zhǔn)，以達(dá)到近似均勻的接種密度，供測(cè)試使用。

3. 接種測(cè)試板：將標(biāo)準(zhǔn)懸浮液接種到含有頭孢西丁片的穆勒-欣頓瓊脂試板上。在瓊脂中加入 4% 的 NaCl。用無(wú)菌棉簽將接種物均勻分布于平板的整個(gè)表面。

4. 培養(yǎng)平板：將接種過(guò)的平板倒置，在 33-35°C 下培養(yǎng) 24 小時(shí)，以便異抗亞群生長(zhǎng)。

5. 評(píng)估生長(zhǎng)情況：檢查平板上頭孢西丁盤(pán)周圍是否存在抑制區(qū)。無(wú)抑菌區(qū)表示耐甲氧西林（MRSA）。如果存在，測(cè)量抑制區(qū)直徑。

6. 確認(rèn)：檢測(cè) 如果表型結(jié)果不明確，則進(jìn)行確證檢測(cè)，如 mecA PCR。

文章為麥瑞科林原創(chuàng)，如需轉(zhuǎn)載，請(qǐng)注明文章鏈接和出處。