來源:麥瑞科林 閱讀量:次發(fā)表時間:2024-05-10 15:16:10
在一項(xiàng)研究中,研究人員旨在從幽門螺桿菌的病原體中找出定植者,以便制定適當(dāng)?shù)闹委熡媱潯S拈T螺桿菌是一種與各種胃病有關(guān)的細(xì)菌,包括急性淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、胃癌和 MALT 相關(guān)淋巴瘤。雖然正常人也會發(fā)生定植,但如果該病菌與毒力因子(如分別由 vacA 和 cagA 基因編碼的空泡毒素和細(xì)胞毒素)相關(guān)聯(lián),則需要進(jìn)行治療。

保存幽門螺桿菌樣本時使用了什么培養(yǎng)基?
研究期間,從每位患者身上采集了四份胃活檢樣本,并保存在不同的培養(yǎng)基中進(jìn)行各種分析。使用的培養(yǎng)基包括Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基、10% 福爾馬林、Tris-EDTA 緩沖液和 10% 尿素肉湯。每種培養(yǎng)基在幽門螺桿菌的鑒定和特征描述中都有特定的作用。
每種培養(yǎng)基發(fā)揮什么作用?
1. Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基:這種培養(yǎng)基用于細(xì)菌培養(yǎng)和幽門螺桿菌的分離。組織樣本在Cary-Blair培養(yǎng)基中均質(zhì),然后接種到Bacto Campylobacter瓊脂試劑盒Skirrow(Difco)中,用于幽門螺桿菌的選擇性生長。
2. 10%福爾馬林:用 10%福爾馬林保存的組織樣本用于組織病理學(xué)檢查。石蠟切片用蘇木精-伊紅、Giemsa 和甲苯胺藍(lán)染色,以研究組織形態(tài)、炎癥細(xì)胞以及是否存在類似幽門螺桿菌的彎曲S型細(xì)菌。
3. Tris-EDTA緩沖液:樣本在 Tris-EDTA 緩沖液中進(jìn)行 DNA 提取和隨后的 PCR 分析。采用旋柱法提取 DNA,并進(jìn)行多重 PCR,以檢測 16SrRNA、vacA 和 cagA 基因的存在,這些基因是幽門螺桿菌鑒定和致病性的特異性標(biāo)記。
4. 10% 尿素肉湯:將組織樣本放入含有酚紅 pH 指示劑的 10% 尿素肉湯中,進(jìn)行快速尿素酶測試。如果在 30 分鐘內(nèi)顏色變?yōu)榉奂t色,則表明幽門螺桿菌具有很強(qiáng)的尿素酶活性。
用于 PCR 分析的液體是什么?
在 Tris-EDTA 緩沖液中收集的組織用于 DNA 提取和隨后的 PCR 分析。使用 QIAGEN 試劑盒中提供的溶液,采用旋柱法提取 DNA。然后對提取的 DNA 進(jìn)行多重 PCR 分析,以檢測是否存在幽門螺桿菌特異的 16SrRNA 基因以及毒力因子 vacA 和 cagA 基因。
為什么 PCR 分析至關(guān)重要?
PCR 分析在區(qū)分共生幽門螺桿菌菌株和潛在致病菌株方面發(fā)揮了關(guān)鍵作用。vacA 和 cagA 基因分別編碼空泡毒素和細(xì)胞毒素,它們的存在表明幽門螺桿菌具有較高的致病性。通過檢測這些毒力因子,研究人員可以區(qū)分無害的旁觀者和潛在的入侵生物,從而幫助做出適當(dāng)?shù)闹委煕Q定。
運(yùn)輸培養(yǎng)基對研究有何貢獻(xiàn)?
使用不同的運(yùn)輸培養(yǎng)基可以對幽門螺桿菌的檢測和特征進(jìn)行全面分析。Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基有利于細(xì)菌培養(yǎng)和分離,從而可以進(jìn)行抗生素敏感性測試并進(jìn)一步確定分離物的特征。福爾馬林固定樣本有助于了解與幽門螺桿菌感染相關(guān)的組織病理學(xué)變化。Tris-EDTA 緩沖液可保持 DNA 的完整性,以便進(jìn)行 PCR 分析,從而檢測與致病性相關(guān)的特定基因。尿素肉湯支持快速尿素酶測試,這是一種廣泛使用的幽門螺桿菌篩查方法。
通過使用這些不同的轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基,研究人員可以利用多種診斷方法,包括培養(yǎng)、組織病理學(xué)、血清學(xué)和分子技術(shù),來全面評估幽門螺桿菌感染及其相關(guān)致病因素。這些方法的整合有助于加深對疾病動態(tài)的了解,并有助于區(qū)分定植者和潛在病原體,最終為治療策略提供依據(jù)。
通過將麥瑞科林Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基納入幽門螺桿菌培養(yǎng)方案,您可以提高結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,同時降低傳統(tǒng)運(yùn)輸方法的復(fù)雜性。采用這種先進(jìn)的解決方案,為更好地了解和管理幽門螺桿菌感染開辟新的可能性。
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