微生物培養(yǎng)基簡(jiǎn)單指南

不同的微生物有不同的營(yíng)養(yǎng)需求，但所有微生物的生長(zhǎng)都需要碳、氮和微量元素。在實(shí)驗(yàn)室中，我們使用培養(yǎng)基來(lái)提供這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

培養(yǎng)基主要有兩種：

1. 化學(xué)定義或合成培養(yǎng)基： 這些培養(yǎng)基有已知的確切成分。

2. 非合成培養(yǎng)基： 這些介質(zhì)有一些未知成分。

大多數(shù)微生物試驗(yàn)都使用非合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基通常只用于特殊實(shí)驗(yàn)或研究。

有些微生物可以在僅含氮或硝酸鹽的簡(jiǎn)單培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。其他微生物則需要蛋白胨（一種蛋白質(zhì)消化物）等更復(fù)雜的成分作為氮源。在臨床環(huán)境中發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)微生物需要更復(fù)雜的化合物才能生長(zhǎng)良好。

培養(yǎng)基可根據(jù)其目的或功能分為幾種類型：

I. 富集培養(yǎng)基

這類培養(yǎng)基添加了血液、血清或動(dòng)物/植物提取物等特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以支持耐藥菌的生長(zhǎng)。例如

血液瓊脂平板（BAP）： 支持肺炎鏈球菌的生長(zhǎng)。

?布魯氏菌瓊脂（或 AnBAP）： 支持厭氧菌生長(zhǎng)。

巧克力瓊脂：支持流感嗜血桿菌的生長(zhǎng)。其他富集培養(yǎng)基包括胰蛋白酶大豆瓊脂（TSA）、胰蛋白酶大豆肉湯（TSB）、TGEA、平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA）、營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA）、LB 瓊脂和 Mueller-Hinton 瓊脂（M-H）。

II. 選擇性培養(yǎng)基

這些培養(yǎng)基含有特定的化學(xué)物質(zhì)，可抑制一類細(xì)菌的生長(zhǎng)，同時(shí)允許另一類細(xì)菌繁殖。例如：

?亞甲藍(lán)（EMB）培養(yǎng)基和麥康凱（MacConkey）培養(yǎng)基： 允許革蘭氏陰性桿菌（如大腸桿菌）生長(zhǎng)，但抑制革蘭氏陽(yáng)性球菌（如葡萄球菌）。

?含抗生素的分離培養(yǎng)基（如 CAN）： 選擇性抑制某些微生物（腸桿菌），同時(shí)允許特定微生物（葡萄球菌）良好生長(zhǎng)。

III. 差異培養(yǎng)基

這些培養(yǎng)基含有特殊的化學(xué)物質(zhì)，可使不同的細(xì)菌表現(xiàn)出不同的特性。例如：

?麥康凱培養(yǎng)基： 乳糖發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌形成粉紅色菌落，而非乳糖發(fā)酵菌形成無(wú)色菌落。

?EMB瓊脂： 乳糖發(fā)酵菌形成深紫色或藍(lán)黑色菌落，而非發(fā)酵菌形成無(wú)色菌落。麥康凱瓊脂和 EMB 瓊脂均可作為鑒別和選擇培養(yǎng)基。血瓊脂平板（BAP）可區(qū)分溶血性和非溶血性細(xì)菌，因此既是富集培養(yǎng)基，也是鑒別培養(yǎng)基。

IV. 富集培養(yǎng)基

這些培養(yǎng)基含有特殊成分，有利于所需細(xì)菌種類的生長(zhǎng)，同時(shí)抑制其他細(xì)菌的生長(zhǎng)。它們通常用于從樣本中分離生長(zhǎng)緩慢或數(shù)量較少的菌種。例如：

?GN肉湯和硒酸鹽亮綠肉湯： 用于糞便樣本微生物檢查，促進(jìn)沙門氏菌的生長(zhǎng)，同時(shí)抑制大腸桿菌等常見(jiàn)細(xì)菌。

?堿性蛋白胨水： 由于 pH 值較高，可促進(jìn)霍亂弧菌的生長(zhǎng)，同時(shí)抑制其他細(xì)菌。

V. 鑒定細(xì)菌特征的培養(yǎng)基

a) 碳水化合物發(fā)酵試驗(yàn)培養(yǎng)基：

- 例如 含 1%乳糖的溴甲酚紫肉湯、含 1%碳水化合物的 CTA、含 1%碳水化合物的酚紅肉湯、含 1%碳水化合物的安德拉德肉湯、含 1%碳水化合物的 O/F 肉湯。

b) 底物利用試驗(yàn)培養(yǎng)基：

- 例如 檸檬酸瓊脂（Simmons Citrate Agar）、醋酸瓊脂（Acetate Agar）。

c) 產(chǎn)酶能力試驗(yàn)培養(yǎng)基：

- 例如：DNase 試驗(yàn)培養(yǎng)基、克里斯滕森瓊脂： DNase 試驗(yàn)培養(yǎng)基、克里斯滕森尿素瓊脂、鳥氨酸或賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基。

d) 特殊代謝物檢測(cè)培養(yǎng)基：

- 例如：甲基紅、VP 培養(yǎng)基： 甲基紅、VP 培養(yǎng)基。

e) 運(yùn)動(dòng)能力檢測(cè)培養(yǎng)基：

- 例如：運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)培養(yǎng)基： 運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)培養(yǎng)基。

f) 變色瓊脂：

- 例如 用于檢測(cè)各種病原體的 CHROMagar 系列。

VI. 保存和運(yùn)送培養(yǎng)基

這些培養(yǎng)基用于保持純培養(yǎng)物的活力和生理特性，例如：

儲(chǔ)存培養(yǎng)基：用于保存普通腸桿菌。

?GermBank 保存裝置： 用于保存各種病原體。

運(yùn)送培養(yǎng)基對(duì)于臨床標(biāo)本至關(guān)重要，可在培養(yǎng)前保持微生物種群不生長(zhǎng)或減少。示例包括：

?需氧培養(yǎng)棉簽（含 Stuart、Amies 或 Cary-Blair 培養(yǎng)基）

?厭氧培養(yǎng)皿或厭氧轉(zhuǎn)管

?緩沖甘油-堿性培養(yǎng)基（用于從糞便中分離志賀氏菌屬）

?彎曲菌管（用于從糞便中分離彎曲菌屬）

轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)（以艾米斯和斯圖爾特為例）：

1. 無(wú)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)--微生物不會(huì)繁殖。

2. 緩沖半固體瓊脂 - 保持拭子水分和適當(dāng)?shù)?pH 值。

3. 含還原劑巰基乙酸鈉。

4. 活性炭（如需要）--去除有毒代謝物，但可能會(huì)干擾涂片觀察。

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