口咽拭子、鼻咽拭子、肛拭子樣本采集和轉(zhuǎn)運(yùn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

一、采樣拭子場(chǎng)景注意事項(xiàng)

檢驗(yàn)呼吸道病毒宜采用植絨拭子采集鼻咽標(biāo)本。

普通拭子標(biāo)本不宜用于厭氧菌培養(yǎng)。

外科手術(shù)標(biāo)本，宜送液體或組織做涂片和培養(yǎng)，拭子標(biāo)本僅用于特殊情況。

二、采樣拭子選擇

標(biāo)本采集常用的拭子：

● 聚酯纖維、滌綸或人造絲頭，柄部為塑料或鋁的拭子：宜用于病毒學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集。病毒學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集不宜使用柄部為木質(zhì)的拭子。

● 棉拭子：宜用于支原體檢驗(yàn)的陰道、宮頸及尿道標(biāo)本的采集，不宜用于細(xì)菌（特別是苛養(yǎng)菌）、衣原體檢驗(yàn)標(biāo)本的采集。

● 滌綸拭子和尼龍拭子：宜用于病毒和細(xì)菌標(biāo)本的采樣。

● 植絨拭子：由尼龍纖維經(jīng)專(zhuān)有的噴霧技術(shù)制成，宜用于呼吸道病毒采樣和真菌培養(yǎng)標(biāo)本的采樣。

● 藻酸鈣拭子：宜用于衣原體和百日咳鮑特菌鼻咽拭子的采集。但不宜用于脂質(zhì)包膜病毒及細(xì)胞培養(yǎng)的采樣，不宜用于淋病奈瑟菌及解脲脲原體的采樣。

三、采樣拭子操作方法和注意事項(xiàng)

1、鼻咽拭子

（1）方法

● 請(qǐng)患者頭部保持不動(dòng)，去除鼻前孔中表面的分泌物；

● 通過(guò)鼻腔輕輕、緩緩插入鼻咽拭子至鼻咽部；

● 當(dāng)遇到阻力后即到達(dá)后鼻咽，停留數(shù)秒吸取分泌物；

● 輕輕旋轉(zhuǎn)取出拭子，置于轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中；

● 用于病毒學(xué)檢驗(yàn)的拭子，將拭子頭浸入病毒運(yùn)送液，尾部棄去，旋緊管蓋；

● 用于細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的拭子，插回采樣裝置或適宜的轉(zhuǎn)運(yùn)裝置中。

（2）注意事項(xiàng)

● 不推薦鼻咽拭子做普通細(xì)菌培養(yǎng)，特殊細(xì)菌除外，如百日咳鮑特菌、腦膜炎奈瑟菌。

● 若懷疑百日咳鮑特菌感染，需提前通知實(shí)驗(yàn)室，準(zhǔn)備特殊的轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基（Regan-Lowe）。條件許可時(shí)可提供接種培養(yǎng)基，直接床旁接種后轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。

● 鼻咽拭子不能用于檢驗(yàn)鼻竇炎的病原菌。

2、口咽拭子

（1）方法

● 請(qǐng)患者坐下，頭后傾，張大嘴，去除鼻前孔中表面的分泌物；

● 采樣者用壓舌板固定舌頭，用滌綸或藻酸鈣拭子越過(guò)舌根到咽后壁及扁桃體隱窩、側(cè)壁等處；

● 反復(fù)擦拭3～5次，收集粘膜細(xì)胞；

● 輕輕取出口咽拭子，避免觸及舌頭、懸垂體、口腔粘膜和唾液；

● 拭子插回采樣裝置中或適宜的轉(zhuǎn)運(yùn)裝置中。

（2）注意事項(xiàng)

● 對(duì)化膿性咽炎，口咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)主要用于篩查A群β-溶血鏈球菌和溶血隱秘桿菌；

● 當(dāng)檢驗(yàn)口咽拭子中的淋病奈瑟菌時(shí)，臨床需提前告知實(shí)驗(yàn)室；

● 對(duì)于兒科患者，宜常規(guī)報(bào)告流感嗜血桿菌；

● 一般情況下，不單獨(dú)選用咽拭子標(biāo)本診斷上呼吸道感染，宜與鼻咽拭子或鼻咽吸取物聯(lián)合檢驗(yàn)以提高呼吸道感染的病原檢出率。

3、糞便標(biāo)本

（1）送檢原則

● 在感染急性期采集腹瀉糞便標(biāo)本；

● 排除一些病原體的攜帶狀態(tài)，需要連續(xù)3份標(biāo)本陰性。若需要連續(xù)采集3份標(biāo)本，則兩次采集標(biāo)本間隔48 h。

（2）方法

● 將糞便排入干燥清潔的便盆，避免使用坐式馬桶或蹲式便盆。糞便標(biāo)本中不宜混入尿液及其它異物，采集過(guò)程盡量無(wú)菌操作；

● 用糞便拭子挑取標(biāo)本中異常部分（有粘液、膿液和血液的部分）2 mL～5 mL糞便懸液或2 g～5 g糞便標(biāo)本置于無(wú)菌螺帽容器中，立即送檢。

（3）標(biāo)識(shí)

● 申請(qǐng)單上建議標(biāo)注特殊病史。

（4）標(biāo)本拒收

● 干燥的拭子、含鋇糞便、黃軟成形便、干便或明顯污染的糞便；

● 一天內(nèi)重復(fù)送檢的標(biāo)本；

● 未使用運(yùn)輸培養(yǎng)基，采集后室溫條件下超過(guò)2 h未送檢的糞便；

● 使用運(yùn)輸培養(yǎng)基，4 ℃條件下保存超過(guò) 48 h或35 ℃條件下保存超過(guò)24 h未送檢標(biāo)本。

（5）注意事項(xiàng)

● 糞便標(biāo)本常規(guī)不進(jìn)行厭氧培養(yǎng)；

● 結(jié)腸造口術(shù)和回腸造口術(shù)標(biāo)本的運(yùn)輸方式與糞便標(biāo)本相同；

● 腸炎和發(fā)熱病人宜同時(shí)送檢血培養(yǎng)；

● 下列腹瀉患者宜連續(xù)3天送檢標(biāo)本：社區(qū)獲得性腹瀉（入院前或72 h內(nèi)出現(xiàn)癥狀）。醫(yī)院獲得性腹瀉（入院72 h后出現(xiàn)癥狀），且至少有下列情況之一：大于65歲并伴有基礎(chǔ)疾病、HIV感染、粒細(xì)胞缺乏癥（中性粒細(xì)胞＜0.5×109/L）及疑似院內(nèi)暴發(fā)感染時(shí)。

4、直腸拭子和肛拭子

（1）送檢原則

● 嬰兒或重癥患者腹瀉時(shí)且暫時(shí)沒(méi)有糞便，才可采集直腸拭子標(biāo)本檢驗(yàn)腹瀉病原菌；

● 肛拭子不宜用于腹瀉病原菌培養(yǎng)；

● 常規(guī)培養(yǎng)通常針對(duì)沙門(mén)菌屬和志賀菌屬，國(guó)際上還包括彎曲菌屬。如果懷疑其他細(xì)菌感染，宜先咨詢(xún)實(shí)驗(yàn)室。

（2）方法

● 無(wú)菌棉拭子用生理鹽水濕潤(rùn)，輕輕地插入肛門(mén)括約肌上方（約6 cm～7 cm），旋轉(zhuǎn)，取出，置于運(yùn)輸培養(yǎng)基中，拭子上可見(jiàn)糞便；

● 對(duì)于淋病奈瑟菌培養(yǎng)，采集肛環(huán)內(nèi)的肛竇部位，盡量避免糞便污染；

● 立即將淋病奈瑟菌培養(yǎng)拭子置于運(yùn)輸培養(yǎng)基中, 或在患者床邊接種。

（3）標(biāo)識(shí)

● 在申請(qǐng)單上標(biāo)注檢査的病原菌, 尤其是懷疑淋病奈瑟菌感染時(shí)。

（4）注釋

● 如果懷疑患者感染大腸埃希菌 O157:H7、耶爾森菌屬、弧菌屬、氣單胞菌屬或鄰單胞菌屬，宜通知實(shí)驗(yàn)室；

● 不宜使用拭子檢驗(yàn)艱難梭菌毒素。

5、子宮頸內(nèi)或?qū)m頸標(biāo)本

● 用溫鹽水濕潤(rùn)陰道窺器；

● 使用陰道窺器輕輕按壓子宮，打開(kāi)窺器，使用宮頸拭子采集分泌物?；蛘叽蜷_(kāi)窺器，將拭子插入宮頸管1 cm～2 cm，轉(zhuǎn)2 圈～3 圈采集分泌物，必要時(shí)停留20 s～30 s并轉(zhuǎn)動(dòng)取樣；

● 懷疑淋病奈瑟菌時(shí)，可以同時(shí)采集直腸拭子與子宮頸標(biāo)本。

6、男性泌尿生殖道標(biāo)本

● 從尿道擠壓分泌物，一根尿道拭子采集分泌物用于培養(yǎng)，保存于轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中送檢。另一根拭子采集分泌物用于涂片，將拭子在玻片表面滾動(dòng)2 cm～3 cm。

● 若無(wú)分泌物，可將泌尿生殖道拭子插入尿道約2 cm，輕輕旋轉(zhuǎn)取出。將標(biāo)本盡快接種于特殊培養(yǎng)基，并置于35 ℃ CO2環(huán)境中培養(yǎng)。接種后的拭子制備涂片用于染色，最好采集兩個(gè)拭子分別用于涂片和培養(yǎng)。

● 尿道分泌物革蘭染色查到白細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌可作為男性淋病患者的診斷依據(jù)。

7、眼科標(biāo)本

（1）方法

● 結(jié)膜囊分泌物：將植絨拭子用病原體保存液或無(wú)菌生理鹽水預(yù)濕，由內(nèi)眥部開(kāi)始從內(nèi)到外旋轉(zhuǎn)輕拭下方結(jié)膜囊和下瞼結(jié)膜表面（注意內(nèi)眥部）, 采集后立即接種培養(yǎng)基或立即轉(zhuǎn)運(yùn)；接種后制備涂片，將拭子在載玻片上自?xún)?nèi)而外滾動(dòng)涂成直徑1.0 cm～1.5 cm的近圓形。

● 角膜及結(jié)膜刮片：由眼科專(zhuān)業(yè)人員采集，角膜刮片推薦用15號(hào)手術(shù)刀片刮取潰瘍基底部、潰瘍進(jìn)行緣或損傷部位，將刮取物直接接種于培養(yǎng)基；瞼結(jié)膜刮片宜翻轉(zhuǎn)上瞼暴露瞼結(jié)膜，固定后，垂直刮擦組織。將刮取物直接涂抹于載玻片上，盡量均勻涂開(kāi)。

● 房水及玻璃體液：由眼科專(zhuān)業(yè)人員采集，將無(wú)菌注射器中的標(biāo)本直接接種于培養(yǎng)基或液體增菌培養(yǎng)基，常規(guī)進(jìn)行苛養(yǎng)菌、真菌及厭氧菌培養(yǎng)，同時(shí)直接制片或甩片制片。

8、耳標(biāo)本

（1）方法

● 取中耳標(biāo)本時(shí)，若鼓膜完整,先用肥皂水清潔耳道，再行鼓膜穿刺術(shù)用注射器抽出中耳內(nèi)液體；

● 取中耳標(biāo)本時(shí)，若鼓膜穿孔,通過(guò)耳鏡用軟桿的采樣拭子收集液體(僅限于需氧培養(yǎng))；

● 外耳道：用濕拭子將耳道的碎屑或硬皮除去，用一新拭子在外耳道用力旋轉(zhuǎn)拭子取樣。

9、皮膚、結(jié)締組織及傷口標(biāo)本

● 閉合性膿腫：消毒皮膚后，用注射器抽取膿腫物，無(wú)菌轉(zhuǎn)移所有抽吸物至厭氧和需氧轉(zhuǎn)運(yùn)裝置中。

● 開(kāi)放性膿腫：用無(wú)菌生理鹽水或75%酒精擦拭去除表面分泌物，盡可能采集抽吸物，或?qū)⒉蓸邮米硬迦胫敛≡畹牡撞炕蚰撃[壁取其新鮮邊緣部分。

● 膿皰或水皰：酒精消毒揮發(fā)后，挑破膿皰，用拭子收集膿液；較大的膿皰消毒后宜直接用注射器抽取。陳舊的膿皰，去除損傷表面，用拭子擦拭損傷基底。

● 蜂窩織炎液化后宜先注射無(wú)菌生理鹽水隨后抽吸，可以獲得足量的標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)。若患者病情迅速進(jìn)展，或蜂窩織炎沒(méi)有液化則需要采集組織活檢標(biāo)本。

● 傷口標(biāo)本：區(qū)分淺表傷口標(biāo)本、深部傷口標(biāo)本及外科手術(shù)傷口標(biāo)本。宜從感染進(jìn)展的前緣采集活檢標(biāo)本?；顧z標(biāo)本和抽吸物（膿液、滲出液）優(yōu)于拭子標(biāo)本；淺表傷口標(biāo)本不能進(jìn)行厭氧培養(yǎng)。

● 燒傷傷口：清潔并清除燒傷創(chuàng)面，有液體滲出時(shí)，用拭子擦拭取樣。燒傷的組織宜做定量培養(yǎng)，定量檢驗(yàn)結(jié)果≥105 CFU/g則可預(yù)示有可能進(jìn)展為創(chuàng)傷相關(guān)膿毒癥。

● 潰瘍或褥瘡：用無(wú)菌生理鹽水或75%酒精擦拭去除表面分泌物，盡可能采集抽吸物。